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本试剂盒通过Buffer PCB裂解植物样品，释放出基因组DNA，然后采用特殊的吸附膜，能够有选择性地吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的基因组DNA。使用本试剂盒从100mg植物组织中可以获得3～10μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。抽提出的DNA可用于酶切、PCR、Southern blot等相关实验。

• 自备材料：水浴锅、小型高速离心机（最大离心力≥ 12000×g）、1.5mL离心管、无水乙醇、异丙醇、RNase A溶液(10mg/mL)、β-巯基乙醇、氯仿等。
  
• 试剂盒初次开启，按瓶身标签说明在PW Solution中加入相应量的异丙醇混匀、Wash Solution中加入相应量的无水乙醇混匀，在瓶身做好标记。于室温密封保存（18mL PW Solution加入12mL异丙醇，7.5mL Wash Solution加入22.5mL无水乙醇；36mL PW Solution加入24mL异丙醇，15mL Wash Solution加入45mL无水乙醇）。
  
• 每次使用前请检查Buffer PCB是否出现沉淀，如有沉淀，请于65℃溶解后使用。
  
• 提前将水浴锅调至65℃备用。

• 将50～100mg的新鲜植物组织在液氮中充分研磨成粉末，并转移至1.5mL的离心管中。
  
  • 研磨是否充分，将会影响基因组DNA的得率。磨碎标准是在加入Buffer PCB后，在溶液中没有大的组织团块。
    
  • 样品尽量不要采用植物的微管组织。
    
  • 对于含水量较多的样品，请尽量在研磨和裂解前挤干去除水分。
• 加入600μL 65℃预热的Buffer PCB和12μL β-巯基乙醇。震荡混匀，置于65℃水浴25min，间或混匀。
  
  • 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
• 加入600μL的氯仿，充分混匀，12000rpm离心5min。吸取上层水相至一个干净的1.5mL的离心管中。
  
  • 含有多酚或多糖的植物组织，可以在进行第4步前用等体积酚:氯仿（1:1，pH8.0）反复混匀，12000rpm离心5min，取上清，反复抽提1～3次。
    
  • 不要吸取到中间层变性蛋白质部分。
• 加入与上层水相等体积Buffer BD，颠倒混匀3～5次，再加与上层水相等体积的无水乙醇，充分混匀后用移液器将其全部加入到吸附柱中，室温静置2min。10000rpm离心1min，倒掉收集管中废液。
  
• 将吸附柱放回收集管中，加入500μL PW Solution，10000rpm离心1min，倒掉收集管中废液。
  
  • PW Solution使用前请检查溶液是否按比例加入异丙醇。
• 将吸附柱放回收集管中，加入500μL Wash Solution，10000rpm，离心1min，倒掉收集管中废液。
  
  • Wash Solution使用前请检查溶液是否按比例加入无水乙醇。
• 将吸附柱放回收集管中，12000rpm离心2min。
  
  • 此步绝不可省略，否则残留的乙醇会严重影响后续实验。
• 取出吸附柱，放入一个新的1.5mL离心管中，在吸附膜中央加入50μL TE Buffer，静置3min，12000rpm离心2min，得到的DNA溶液置于-20℃保存或直接用于后续试验。
  
  • 如果想提高DNA的得率，可重复步骤8或将TE Buffer 60℃预热。